文章标题：LC-MS/MS法测定人血清中的可替宁和3-羟基可替宁含量及其应用

客户单位：北京医院检验科/国家老年医学中心

汇智泰康提供服务：建立和验证可替宁和3-羟基可替宁的含量检测的LC-MS/MS方法，完成上千例人血浆中可替宁和3-羟基可替宁的含量检测

文章概要：

【研究背景】

烟草流行是世界上面临的最大公共卫生威胁之一，每年造成700多万人死亡。这些死亡人数超过600万是直接吸烟的结果，而大约89万人是非吸烟者接触二手烟的结果。因此准确可靠的评价环境烟草烟雾的暴露水平刻不容缓。可替宁是烟草中尼古丁在人体内的主要代谢物，是目前评价吸烟暴露水平的最佳生物指标之一。

目前国内外对生物样本中可替宁和3-羟基可替宁的测定方法有气相色谱，高效液相色谱法、液相色谱-串联质谱联用法（LC-MS/MS）等，但这些方法都存在一定的局限性，如样本处理过程复杂 ，血清用量较大，检测时间较长，灵敏度低等。本实验拟建立高效、灵敏、准确、专属性强的LC-MS/MS方法，以测定人血清中可替宁和3-羟基可替宁的含量水平。同时两个代谢物成分的比值，对于吸烟者成瘾性分析等方面都有很好的参考意义。

【研究方法】

人血清样本以乙腈沉淀蛋白后，选用ZORBAX SB-Phenyl色谱柱，以甲醇（含0.3%甲酸）-水（含0.15%甲酸）为流动相进行分离；选用API5500型三重四级杆串联质谱仪的多重反应监测（MRM）扫描方式进行监测。

【研究结果】

可替宁，3-羟基可替宁和可替宁-d3同位素内标的保留时间分别为2.56 min，1.58min和2.56 min；血清中可替宁和3-羟基可替宁线性范围为0.05~500 ng·mL-1，0.50~1250 ng·mL-1。可替宁定量下限为0.05 ng·mL-1，3-羟基可替宁为0.5 ng·mL^-1。日内、日间相对标准差（RSD）均小于11%；相对偏差（RE）均在±7%的范围以内；平均提取回收率可替宁为98.54%，3-羟基可替宁为100.24%。

【研究结论】

结果表明，该方法快速、灵敏高、专属性强、重现性好，适用于临床人血清中可替宁和3-羟基可替宁的快速检测。通过测定人血清中可替宁的含量可以确定最佳临界值，为区分吸烟与非吸烟人群提供依据。

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汇智泰康的分析测试实验室是以质谱分析为核心能力的分析检测平台，可对内源及外源化合物进行精准定量、定性分析。实验室配备了多套质谱AB SCIEX 质谱分析仪（LC-MS/MS），其中包括TRIPLE QUAD 5500、API 5000、API 4000 QTRAP以及QTOF 5600+，还配有多台气质和气质质联用仪 （GC-MS&GC-MS/MS）、高效液相色谱、元素分析仪（Thermo ICP-MS）、原子吸收（AAS）、原子荧光（AFS）等检测仪器。此外还配备有大量的分析相关的仪器及辅助设备。